En mars 1965, la petite Fiat 500 subit une série de modifications de la carrosserie et de la mécanique: c'est ainsi que la 500F est née. La carrosserie avait pour la première fois les portes articulées à l'avant, tandis que la mécanique était renforcée dans les arbres d'embrayage, de différentiel et de transmission. Le moteur était du type 110F000, 499,5 cm3 et 18 chevaux. La "F" est restée en production jusqu'en 1972.