Anticipata dalla 350 GT 2+2 e sempre carrozzata da Touring, nel 1966 entrò in listino la Lamborghini 400 GT. La vettura adottava, montato anteriormente, il V12 da 4 litri della precedente coupé (che continuò a essere commercializzata), che con i suoi 320cv a 6500 giri garantiva una velocità massima di circa 250 km/h. Rispetto alla 350 GT, furono sostituiti il cambio ZF e il differenziale Salisbury con nuove unità progettate ex novo da Dallara. La 400 GT rimase in produzione fino al 1968.